Tth MutS Protein試劑DNA錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)（MMR）主要由三種蛋白組成，包括MutS、MutL和MutH。其中MutS負(fù)責(zé)識(shí)別錯(cuò)配或未結(jié)合位點(diǎn)并與

之結(jié)合，隨后MutL蛋白與MutS-DNA形成復(fù)合體，增強(qiáng)其穩(wěn)定性，并激活MutH的內(nèi)切酶活性，協(xié)同解旋酶和單鏈結(jié)合蛋白將

錯(cuò)配序列切除。 ttMutS蛋白是一種分離自嗜熱棲熱菌（Thermus thermophilus）的DNA錯(cuò)配修復(fù)蛋白，

在最適溫度 65-75℃ 范圍內(nèi)，該蛋白具有依賴于DNA的ATPase 活性。 ttMutS蛋白在DNA復(fù)制中識(shí)別錯(cuò)配堿基和插入堿基形成

的Loop結(jié)構(gòu)，其緊密結(jié)合Loop結(jié)構(gòu)從而阻止聚合酶的延伸。因此，其可用于錯(cuò)配PCR反應(yīng)（ARMS-PCR）和基因芯片中，

除此外，在基因合成中能阻止錯(cuò)配的產(chǎn)生，降低基因突變率。

組分

組分名稱50 μg

Tth MutS Protein (1 μg/μl)50 μl

儲(chǔ)存

-20℃可保存3年。

Storage Buffer

20mM Tris-HCl，pH7.5

200mM NaCl

5mM DTT

25%甘油

Tth MutS Protein試劑恒溫?cái)U(kuò)增使用策略及實(shí)例展示

應(yīng)用實(shí)例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果，可以看到檢測反應(yīng)<20min(達(dá)平臺(tái)期)。

應(yīng)用實(shí)例2： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略，在反應(yīng)結(jié)束后，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果。

應(yīng)用實(shí)例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。

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