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?胎牛血清的正確存放與解凍

更新時(shí)間:2024-04-19      點(diǎn)擊次數(shù):514

胎牛血清的正確存放與解凍

1)保存血清方法?


  我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時(shí),請勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)?/span>

滅菌容器內(nèi),再放回冷凍。


2)如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?


  我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地

搖晃均勻。


3)血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?


  血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清

解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但少量這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。


  若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g 稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議

您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜。


4)為什么要熱滅活血清?


  加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。

在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES 細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。

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5)有必要做熱滅活嗎?


  實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),

或沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著

的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)",常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,

又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,

不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量!


6)為什么儲(chǔ)存在冰箱中的胎牛血清會(huì)出現(xiàn)少量沉淀?


  胎牛血清沒有預(yù)老化,儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或

可見的混濁。這應(yīng)該不會(huì)影響血清的質(zhì)量。推薦在-20℃儲(chǔ)存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。


7)如何避免沉淀物的產(chǎn)生?


  我們建議您在使用血清的時(shí)候,注意下列的操作:


  解凍血清時(shí)請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生

沉淀物。解凍血清時(shí)請隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。

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